NIBSC 抗PT S5亞基單克隆抗體7E3

產品時間：2022-03-04

簡要描述：

NIBSC 99/568 抗PT S5亞基單克隆抗體7E3（標準品）材料 7E3 是一種與百日咳毒素 S5 亞基反應的單克隆抗體。用于生產單克隆抗體的雜交瘤細胞系由日本東京國立傳染病研究所的 H. Sato 博士和 Y. Sato 博士建立。它用作鑒定百日咳毒素的研究試劑。

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非 WHO 參考材料

抗 PT S5 亞基單克隆抗體 7E3

NIBSC 99/568

酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法：破碎細胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應。
七.堿變性快速制備：先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA。

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